Reporte de práctica 2: Acción de la amilasa sobre el almidón

Universidad Nacional Autónoma de México

Colegio de Ciencias y Humanidades

Plantel Sur

 

 

 

 

Actividad experimental No. 2

 

Acción de la amilasa sobre el almidón

 

 

Grupo: 518

 

 

 

Autores:

 

 

Castelán Fernández Adrián

Guerrero Hernández Brenda

Landa Becerril Angélica

Moreno Gutiérrez Samara Yaél

Pérez García Claudia

 

 

 

Preguntas Generadoras

1.    ¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón?

Rompe las cadenas de almidón y las desdobla hasta obtener maltosa, dextrinas límite y glucosa: para desdoblar el almidón se necesitan varias amilasas siendo las principales, las alfa y beta amilasas.

2.    ¿Cómo está formado el almidón químicamente?

El almidón contiene dos polisacáridos diferentes: amilosa y amilo pectina; la amilosa está constituida por cadenas rectilíneas de glucosa con uniones a 1-4; la amilo pectina está constituida por cadenas ramificadas de uniones de glucosa en uniones alfa 1-4 y alfa 1-6 existiendo también uniones del tipo a 1-3.

Estructura del almidón

 

1.    ¿Qué es la amilasa desde el punto de vista químico?

La amilasa o ptialina es una enzima que fragmenta el almidón en sus componentes más sencillos para obtener azúcares simples.

2.    ¿Cuál es el papel que desempeña el almidón en los animales?

En los animales se le denomina glucógeno y funciona como sustancia de reserva energética.

3.    ¿Por qué es necesario para los animales que la amilasa actúe sobre el almidón?

Debido a que el almidón está compuesto de cadenas muy largas de polisacáridos, el cuerpo no tiene la capacidad de procesarlo completamente, también pasa lo mismo con la celulosa, por lo tanto no se aprovecharía y no se obtendrían la glucosa y la maltosa.

Hipótesis: 

Por medio de nuestra saliva y a través de las sustancias como el Lugol y el Benedict obtendremos  la presencia de almidón y azúcares, ya que el Lugol nos dará la presencia de almidón, obteniendo un tono violeta o azul potente, y el Benedict nos dará la presencia de azúcares a través de un tono marrón o rojo ladrillo, ya que se romperán los enlaces de almidón con la amilasa (enzima).

 

Introducción

La amilasa es una enzima que fragmenta el almidón en sus componentes. Ésta, también denominada ptialina o tialina, es un enzima hidrolasa que tiene la función de digerir el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples. Los órganos productores de amilasa sérica son las glándulas salivales.

Las enzimas actúan sobre la estructura molecular de los alimentos, modificándolos, y son específicas. La digestión del almidón comienza en la boca.  Al masticar el alimento, éste se recubre de saliva, que contiene la ptialina, que es la enzima que desdobla el almidón.  Éste puede romperse o hidrolizarse por medios químicos o enzimáticos. El almidón, además sufre la acción del jugo pancreático.  Como consecuencia de ello se convierte en maltosa, isomaltosa y glucosa.  La maltosa y la isomaltosa experimentan otras transformaciones en el intestino, todavía, antes de entrar en el torrente sanguíneo.

 

 

Objetivos:

·         Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón.

·         Identificar los productos de la acción de la amilasa sobre el almidón.

·         Caracterizar la digestión enzimática realizada por la secreción de las glándulas salivales.

 

Material:

·         Papel filtro

·         Embudo

·         5 tubos de ensayo

·         2 goteros

·         2 cápsulas de porcelana

Material biológico:

·         Muestra de saliva

Sustancias:

·         Agua destilada

·         Almidón

·         Reactivo de Benedict

·         Reactivo de Lugol para almidón

Equipo:

·         Balanza granataria electrónica

·         Parrilla con agitador magnético

 

 

Método:

A. Obtención de la enzima amilasa

Después de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro  para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1  ml.

Mililitro de saliva, filtrado.

 

La saliva así obtenida, se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada, así se obtiene la preparación de enzima base.

Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada.

Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo, se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima. En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2%.

Los tubos se colocan en baño maría a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón.

Preparaciones en Baño María a 37°C

 

Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño María y se harán las pruebas del lugol y Benedict

B. Reacciones de lugol para almidón y Benedict

La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta característico. Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva.

Prueba del lugol, reactivo con color azul-violeta

 

La prueba de Benedict permite identificar a los azúcares reductores. Toma 1 ml de cada uno de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño María, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azúcares como la glucosa y la maltosa.

Prueba de Benedict, precipitado de color rojo ladrillo

Resultados:

Contenido del  Tubo	Reacción de Lugol	Reacción de Benedict
Amilasa + almidón + agua	Inicialmente el color fue café oscuro casi negro que conforme pasó el tiempo se volvió café claro con tono un poco amarillo. Negativa, no reconoce el lugol la presencia de la maltosa.	El color inicial fue morado oscuro, azul oscuro y conforme pasó el tiempo, fue claro, a los 15 minutos del baño María, se volvió rojo ladrillo por la presencia de glucosa y maltosa.
Almidón + agua	Positiva El color inicial fue café casi negro y se tornó morado oscuro	El color inicial fue morado oscuro, azul oscuro a claro y después de 15 minutos verde claro por presencia de almidón

Interpretación de Resultados

Pudimos observar el color azul violeta en una de las substancias, esto quiere decir que estaba presente el almidón, entonces al actuar la amilasa en el almidón se rompieron los enlaces peptídicos que lo mantenían como polisacárido, volviéndolo  monosacárido, que en este caso fue, en glucosa y maltosa.

El color rojo ladrillo se debe a la oxidación que se presentó y el reactivo Benedict, junto con la hidrólisis ayudaron a la identificación de compuestos simples, por lo cual al no haber amilasa en el segundo tubo, se presenta la oxidación y el cambio a color verde.

Discusión (Comentarios):

·         Castelán Fernández Adrián:

Esta actividad experimental no era demasiado complicada, aunque desde ciertos puntos de vista se me hizo poco práctica, pues el tiempo que requerían ciertos procesos era bastante y nos hacía apresurarnos sin poder ser objetivos, y solamente seguimos por inercia la práctica. Es decir, siento que faltó tiempo para, además de hacer la práctica poder hacer comentarios más a fondo sobre ésta.

Aun así, fue bastante interesante, pero reconozco que escupir tu propia saliva dentro de un tubo de ensayo es una sensación poco agradable, aun así, aprendí mucho de una manera agradable.

·         Guerrero Hernández Brenda:

En lo personal, no me gustó la práctica, porque era muy confusa. Sin embargo, debo reconocer que sí era interesante. Varias cosas no nos salieron como esperamos, incluyendo el tiempo, ya que muchos compañeros no se dieron cuenta de que las parrillas estaban desconectadas y cuando nos dimos cuenta, ya habíamos perdido tiempo valioso. En nuestro caso, calentamos de más el agua y tuvimos que bajarle de nuevo la temperatura.

      A pesar de todos estos inconvenientes, si se lograron los objetivos de la práctica y sirvió para que ampliáramos el conocimiento sobre las enzimas.

 

·         Landa Becerril Angélica:

La práctica fue interesante, sobre todo el poder observar una de las miles de funciones que suceden en nuestro cuerpo, todo el experimento basado en la digestión química muestra lo que tu saliva puede hacer con las enzimas que tenemos y pensar que son selectivas es más impresionante aún. Por supuesto aprendí que la digestión es la transformación de un compuesto complejo a uno simple con ayuda de las enzimas, que a su vez esas son proteínas, y que nuestra temperatura corporal hace la reacción de la hidrólisis para poder realizar los procesos metabólicos.

 

·         Moreno Gutiérrez Samara Yaél:

Me pareció interesante la práctica aunque no se pudieron llegar a ver los resultados para comprobarlos, por falta de tiempo. De ahí en fuera se me hizo una buena y dinámica práctica, un poco asquerosa ya que tuve que ver a mi compañero escupir, puesto que se requería la saliva como uno de los materiales. En conclusión, fue una buena práctica.

 

·         Pérez García Claudia:

En la práctica surgieron algunos inconvenientes como la falta de tiempo, ya que el baño María requerido para los tubos de ensayo tomaba 15 minutos que gastamos por preparar las muestras. En la práctica comprobamos que la amilasa es una enzima producida por las glándulas salivales y por encontrarse en el cuerpo humano no soporta temperaturas mayores a 37 grados centígrados, por lo que se debe manejar con cuidado si se quiere mantener a la enzima en un perfecto estado y evitar su desnaturalización. Por lo cual otro problema que surgió en la realización de la práctica fue la temperatura del matraz, pues este se elevó rápidamente calentándose de más y  debido a ello requerimos de tiempo y aplicación de agua para equilibrar la temperatura y así colocar los tubos de ensayo. La hipótesis se comprobó y se cumplió la mayoría o todos los objetivos del experimento.

 

Conclusión:

Concluimos que el experimento forma parte de la explicación de lo que es la digestión química,  que consta en convertir los compuestos complejos a simples, en donde participan las enzimas, que son selectivas como es el caso de la amilasa, que se encuentra en la saliva y entonces podemos concluir que el almidón que es un polímero, por medio de la degradación o digestión se convierte en compuestos más simples llamados monómeros, como son la glucosa y la maltosa.

 

Bibliografía:

·         Audesirk, T., et al. La Vida en la Tierra, 6ª edición, Prentice Hall, México, 2003.

·         Curtis, H., et al. Biología, 6ª edición en español, Editorial Médica Panamericana, España, 2000.

·         Purves, W. K., et al. Vida. La Ciencia de la Biología, 6ª edición, Editorial Médica Panamericana, México, 2002.

·         Solomon, E. P., et al. Biología, 5ª edición. McGraw-Hill Interamericana, México, 2001.

• Tovar, María Eugenia. Programa de Biología III. 2010.